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有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時,會很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行ATCC菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存,它是基本的微生物保存法,例如酸奶等常用菌種的保存。
傳代保存時,培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸ATCC菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
一般地,大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好,像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以使用37℃進(jìn)行保存,而蕈類等大型食用菌的ATCC菌種則可以室溫直接保存。
傳代培養(yǎng)保存法雖然簡便,但其缺點也很明顯,如:
① ATCC菌種管棉塞經(jīng)常容易發(fā)霉;
② 菌株的遺傳性狀容易發(fā)生變異;
③ 反復(fù)傳代時,菌株的病原性、形成生理活性物質(zhì)的能力以及形成孢子的能力等均有降低;
④ 需要定期轉(zhuǎn)種,工作量大;
⑤ 雜菌的污染機(jī)會較多。
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